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siRNA轉(zhuǎn)染操作及要點(diǎn)
發(fā)布時(shí)間: 2023-08-07 點(diǎn)擊次數(shù): 1052次轉(zhuǎn)染試劑儲存
轉(zhuǎn)染試劑-20°C避光保存,Trans Enhancer于2-8°C存放
體外轉(zhuǎn)染操作流程
1:細(xì)胞接種:轉(zhuǎn)染前一天接種細(xì)胞,使細(xì)胞在轉(zhuǎn)染時(shí)密度在30-50%
2:siRNA-Starvio 轉(zhuǎn)染復(fù)合物準(zhǔn)備:Starvio 用25ulTrans Enhancer 稀釋室溫孵育5min將siRNA稀釋液與 Starvio 稀釋液混合(總體積50ul)
將轉(zhuǎn)染復(fù)合物加到培養(yǎng)的細(xì)胞內(nèi)
注意事項(xiàng)
1:建議對轉(zhuǎn)染條件進(jìn)行優(yōu)化,特別是第一次使用。例如:24孔培養(yǎng)板,siRNA 用量在 6、12、18、24、30 pmol之間調(diào)整;
2:Starvio 試劑用量在1.0-3.0ul之間調(diào)整;
3:轉(zhuǎn)染過程盡量不要使用抗生素,否則會導(dǎo)致細(xì)胞死亡;
4:增加計(jì)算接種細(xì)胞的數(shù)量,使轉(zhuǎn)染時(shí)細(xì)胞密度在30-50%左右。
深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O(shè)在廣東,服務(wù)面向全國。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。
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