二、儀器藥品

剪刀                                   分析天平

稱量皿                                 烘箱

刀片                                   金屬模板

紗布                                   錫紙

三氯-乙酸

三、實(shí)驗(yàn)步驟

1．選擇測(cè)定樣品

在田間選擇有代表性的植株葉片（如葉片在植株上的部位、葉齡、受光條件等）20片，用小紙牌編號(hào)。

2．葉子基部處理

為了不使選定葉片中光合作用產(chǎn)物往外運(yùn)而影響測(cè)定效果的準(zhǔn)確性可采用下列方法進(jìn)行處理。

（1）可將葉片輸導(dǎo)系統(tǒng)的韌皮部破壞。如棉花等雙子葉植物的葉片可用刀片將葉柄的韌皮部環(huán)割0.5厘米左右寬。

（2）如小麥、水稻等單子葉植物，由于韌皮部和木質(zhì)部難以分開處理，可用剛在開水中浸過的紗布或棉花做成夾子在葉子基部燙傷一小段即可（一般90℃以上的開水燙20秒）。

（3）由于棉花葉柄木質(zhì)化程度低，葉柄易受折斷。用開水燙又難以掌握燙傷的程度，往往不是燙得不夠便是燙得過重使葉片下垂、改變了葉片的角度。因此可改用化學(xué)方法來處理，選用適量濃度的三氯-乙酸點(diǎn)涂葉柄以阻止光合產(chǎn)物的輸出。三氯-乙酸是一種強(qiáng)烈的蛋白質(zhì)沉淀劑，滲入葉柄后可將篩管生活細(xì)胞殺死而起到阻止有機(jī)物質(zhì)運(yùn)輸?shù)淖饔?。三?乙酸的濃度視葉柄幼嫩的程度而異，以能顯著灼傷葉柄而又不影響水分供應(yīng)，不改變?nèi)~片角度為宜。一般使用5%的三氯-乙酸。為了使?fàn)C后或環(huán)割等處理后的葉片不致下垂影響葉片的自然生長角度可用錫紙或塑料管包圍之，使葉片保持原來生長角度。

3．剪取樣品

葉基部處理完畢后，即可剪取樣品，記錄時(shí)間，開始進(jìn)行光合作用測(cè)定。一般按編號(hào)次序分別剪下對(duì)稱葉片的一半（主脈不剪下），按編號(hào)順序夾于濕潤的紗布中，貯于暗處。過四、五小時(shí)后，再依次剪下另外半葉，同樣按編號(hào)夾于濕潤紗布中，兩次剪葉的速度應(yīng)盡量保持一致，使各葉片經(jīng)歷相等的光照時(shí)間。

4．稱重比較

將各同號(hào)葉片兩半按對(duì)應(yīng)部位迭在一起，在無粗葉脈處用已知面積的打孔器取小圓葉片數(shù)個(gè)分別置于光照及暗中的兩個(gè)稱量皿中，在80-90℃下烘至恒重（約5小時(shí)），在分析天平上稱重比較。

5．計(jì)算結(jié)果

葉片干重差之總和（以mg表示）除以葉片面積（換成dm2，1dm2=100cm2）及光照時(shí)數(shù)，即得光合作用強(qiáng)度，以干物質(zhì)mg/dm2·h表示之。計(jì)算公式如下：

由于葉片內(nèi)貯存的光合產(chǎn)物一般為蔗糖和淀粉等，可將干物質(zhì)重量乘系數(shù)1.5，得二氧化碳同化量，單位為CO2mg/dm2·h。