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    細(xì)胞中液泡系活體染色

    發(fā)布時(shí)間: 2023-01-12  點(diǎn)擊次數(shù): 2135次

    簡(jiǎn)介

    細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)是利用中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑的特性,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

    原理

    細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本原理是動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)由單層膜包裹的小泡都屬于液泡系,包括高爾基復(fù)合體、溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、轉(zhuǎn)運(yùn)泡、吞噬泡等。軟骨細(xì)胞內(nèi)含有較多的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達(dá)的高爾基復(fù)合體,能合成與分泌軟骨黏蛋白及膠原纖維等,因而液泡系發(fā)達(dá)。中性紅(neutrol red)是液泡系的專一性活體染色劑,在細(xì)胞處于生活狀態(tài)時(shí),只將液泡系染成紅色,細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核不被染色。

    材料與儀器

    器材:
    解剖器材、蠟盤(pán)、載玻片、蓋片、吸管、吸水濾紙、普通光學(xué)顯微鏡、蟾蜍。
    試劑:

    ① 1/3000 中性紅;

    ② 0.65% Ringer 液(兩棲動(dòng)物用)(氯化鈉,0.65 g;氯-化-鉀,0.042 g;氯化鈣,0.025 g;蒸餾水,100 ml。)

    步驟

    細(xì)胞中液泡系活體染色實(shí)驗(yàn)的基本過(guò)程可分為如下幾步:
    A 取蟾蜍 1 只,搗毀脊髓法處死,將其腹面朝上固定于蠟盤(pán)上,剪開(kāi)腹腔,取胸骨劍突軟骨最薄部分的一小片,置于載片上。
    B 滴加 1/3000 中性紅,染色 15 min。
    C 濾紙吸去染液。
    D 滴加 0.65% Ringer 液,蓋上蓋片,用濾紙從蓋片側(cè)面吸取多余液體。
    E 鏡下觀察。

    注意事項(xiàng)

    1 為便于觀察,在取胸骨劍突時(shí),盡量取較薄部位。

    2 本實(shí)驗(yàn)因是活體染色,在實(shí)驗(yàn)的整個(gè)過(guò)程中,應(yīng)注意保持標(biāo)本的活體狀態(tài),特別在取材時(shí)應(yīng)做到準(zhǔn)確、快速。


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