細(xì)胞保種

【實(shí)驗(yàn)材料】細(xì)胞、DMSO、0.25% Trypsin-EDTA（或細(xì)胞刮刀）、100 X雙抗、PBS、胎牛血清、DMEM 完-全培養(yǎng)基、75% 乙醇、胰酶、異丙醇；

【儀器與用品】凍存管、37度恒溫水浴鍋、培養(yǎng)皿（6 cm）、細(xì)胞凍存盒（已添加異丙醇）或凍存泡沫盒、記號筆、-80度冰箱、倒置相差顯微鏡、凍存管、37度恒溫水浴鍋、培養(yǎng)皿（6cm）、液氮罐、離心機(jī)、細(xì)胞房專用超凈臺、移液槍及移液槍頭（無菌或滅菌后烘干）、一次性細(xì)胞計數(shù)板、細(xì)胞自動計數(shù)儀、培養(yǎng)箱、移液管。

1、液氮凍存不建議用國產(chǎn)凍存管，復(fù)蘇時容易爆管；

2、消化細(xì)胞時，不能過度消化；

3、DMSO溶于DMEM培養(yǎng)基會放熱，應(yīng)提前5-10分鐘配置凍存液。用凍存盒時避免異丙醇將標(biāo)記擦掉；

4、二甲基亞砜能穿透許多合成的或天然的膜，包括皮膚和橡膠手套。因此，應(yīng)謹(jǐn)慎處理。將凍存管放入液氮時，必須使用保護(hù)性手套和面罩。

1、細(xì)胞消化過度，導(dǎo)致復(fù)蘇時細(xì)胞狀態(tài)不好；

2、負(fù)八十冰箱中長期保存細(xì)胞效果不好，應(yīng)及時將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中；

3、國產(chǎn)凍存管在液氮中容易漏液氮，導(dǎo)致復(fù)蘇時曝管，所以放液氮中盡量使用質(zhì)量較好的凍存管。

以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。

安培生物科技有限公司介紹：

安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。