文章描述了一個(gè)典型的工作流程，與細(xì)胞操作需要注意的必要步驟，為了成功地應(yīng)用哺乳動(dòng)物細(xì)胞系，它們必須在受控的條件下生長(zhǎng)，并需要自己特定的生長(zhǎng)介質(zhì)。此外，為了保證一致性，必須定期監(jiān)測(cè)它們的生長(zhǎng)情況。當(dāng)細(xì)胞系達(dá)到約80%的合流時(shí)，必須傳代培養(yǎng)，以確保細(xì)胞的正常生長(zhǎng)和健康。80%的重合性是指培養(yǎng)容器表面的80%被細(xì)胞覆蓋。

細(xì)胞培養(yǎng)一旦開(kāi)始，由于細(xì)胞數(shù)量的增加、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消耗和有毒代謝物的增加，它不能無(wú)限期地生長(zhǎng)，最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡。此外，研究人員通常對(duì)細(xì)胞要進(jìn)行多次實(shí)驗(yàn)，因此不希望一次用完所有的細(xì)胞。傳代或分裂細(xì)胞，通過(guò)去除培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)移細(xì)胞到新鮮的生長(zhǎng)培養(yǎng)基，細(xì)胞被給予新鮮的營(yíng)養(yǎng)同事有毒的代謝物也被去除，細(xì)胞就會(huì)被賦予新的活力繼續(xù)生長(zhǎng)。

細(xì)胞在培養(yǎng)液中的生長(zhǎng)曲線由四個(gè)階段組成:生長(zhǎng)開(kāi)始前的潛伏期(滯后期)，指數(shù)生長(zhǎng)期(對(duì)數(shù)期)，細(xì)胞數(shù)量快速增長(zhǎng)逐漸放緩的平穩(wěn)期和細(xì)胞死亡的死亡期，這是因?yàn)槿狈I(yíng)養(yǎng)和錯(cuò)誤的生存條件。在對(duì)數(shù)期應(yīng)更換培養(yǎng)基，細(xì)胞在到達(dá)固定期前應(yīng)進(jìn)行傳代，如圖1.

圖一

所以培養(yǎng)細(xì)胞的同學(xué)請(qǐng)注意：

為了保持細(xì)胞的健康和積極生長(zhǎng)，有必要更新生長(zhǎng)培養(yǎng)基，并定期傳代。根據(jù)細(xì)胞類型的不同，培養(yǎng)基在對(duì)數(shù)期可以發(fā)生幾次改變。傳代細(xì)胞的最佳時(shí)間是在對(duì)數(shù)期和固定期之間，即細(xì)胞達(dá)到合流之前。

圖二

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