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    為什么細胞會抱團?因為天氣冷了?

    發(fā)布時間: 2021-12-09  點擊次數(shù): 3891次

    是否總是遇到細胞抱團的現(xiàn)象?是否總是因為搞不清楚細胞抱團原因而困惑?是否總是因為難以將抱團細胞拯救回來而抓狂?童鞋們,我來拯救你們的細胞了,今天給大家從四個層面剖析細胞抱團的真實原因,快來圍觀吧!


    一、細胞本身生長特性有抱團傾向

    有些細胞本身有抱團生長的特性,給大家看五種喜歡抱團的細胞類型:


    細胞類型①:NCI-H716 人結(jié)直腸腺癌細胞

    形態(tài):淋巴母細胞樣

    生長特性:懸浮生長


    圖片
    細胞喜歡在懸浮液中呈葡萄狀聚集,抱團細胞粒粒飽滿


    細胞類型②:Caco-2人結(jié)直腸腺癌細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長特性:貼壁生長


    圖片
    此細胞喜歡貼壁成片分布,呈融合狀,細胞個頭大小不勻


    細胞類型③:CaLu-3 人肺癌細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長特性:貼壁生長


    圖片
    此細胞也是喜歡聚集分布,呈片狀,片狀之間有空白



    細胞類型④:SH-SY5Y人神經(jīng)母細胞瘤細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長特性:貼壁和懸浮生長


    圖片
    此細胞貼壁居多,有輕微的抱團傾向



    細胞類型⑤:BT-474人乳腺癌細胞

    形態(tài):上皮樣

    生長特性:貼壁、片狀生長


    圖片
    此細胞也是喜歡片狀生長



    除了有喜歡抱團的細胞類型,也會有喜歡分散生長的細胞類型,來給大家展示二種細胞類型:

    細胞類型①:MSC(人源脂肪來源)

    形態(tài):成纖維樣

    生長特性:貼壁生長


    圖片
    此細胞成纖維樣,均勻分布,平鋪皿底,不留空隙



    細胞類型②:HEF小兒包皮成纖維細胞(人源脂肪來源)

    形態(tài):成纖維樣

    生長特性:貼壁生長


    圖片
    此細胞也是喜歡分散生長,均勻分布



    大多數(shù)上皮樣或神經(jīng)母細胞瘤樣的細胞更喜歡抱團生長,而大多數(shù)成纖維樣細胞更喜歡分散、均勻生長。


    又有一個問題來了,那就是我們?nèi)绾螀^(qū)分細胞抱團正不正常。

    這里開始劃重點了,大家看好了:

    1. 如果細胞本身是分散生長,結(jié)果抱團嚴(yán)重,說明細胞“生病"了,我們要給細胞“診治"。

    2. 如果本身生長特性就有抱團的細胞,如何判斷它的抱團正不正常呢?


    這里小編告訴您,細胞哪怕是抱團了,也是“粒粒飽滿,棱角分明"的,回頭看看上面抱團的細胞,是不是細胞之間有明確的“分界線",這說明它們抱在一起很健康;而異常的細胞抱團,你是觀察不到細胞之間的“界限"的,細胞形態(tài)也不規(guī)則,邊緣模糊,遠遠看去,抱團的細胞像“一團漿糊"。



    二、細胞老化更容易抱團 


    細胞類型:MSC(人源臍帶來源第6代)

    形態(tài):成纖維樣

    生長特性:貼壁生長

    圖片
    如圖所示:

    人臍帶來源第6代的間充質(zhì)干細胞,白色箭頭指示的是發(fā)生細胞老化的MSC細胞,β-半乳糖苷酶染色陽性,染上藍色。由圖片可以看出老化細胞體積增大、細胞扁平。白圈圈起來的是聚團細胞,老化細胞容易聚團生長,狀態(tài)變差。


    三、血清批間差可能導(dǎo)致細胞抱團 

    那么問題來了,血清為何有批間差?

    因為血清來源于動物,其組成成分有1000種左右,且血清組成及含量常隨供血動物的年齡、生理條件和營養(yǎng)條件而異。每個批號的組分百分比含量都是不固定的,所以批間差異是存在的。

    圖片

    H9c2 低密度正常形態(tài)

    舊批次血清


    圖片

    H9c2 低密度抱團形態(tài)

    新批次血清


    圖片

    H9c2高密度異常形態(tài)

    舊批次血清


    圖片

    H9c2高密度異常形態(tài)

    新批次血清


    血清批間差可能會導(dǎo)致細胞抱團。

    如圖所示,大鼠心肌細胞在更換了新批次的血清之后,隨著傳代次數(shù)的增加,抱團明顯。正常低密度下,細胞舒展開來,均勻分散,但異常的的細胞會呈現(xiàn)聚集生長狀態(tài),高密度下正常細胞像鋪路石一樣均勻鋪滿,不留空隙,但高密度下異常的細胞,形態(tài)模糊,難以辨認,像四川九寨溝一樣的溝壑重生。


    四、胰酶消化不當(dāng)容易導(dǎo)致細胞抱團 

    圖片

    HEK293細胞


    導(dǎo)致細胞抱團的第一種情況是胰酶消化操作不當(dāng)。

    如果您經(jīng)常遇到傳代的細胞貼壁后老是貼壁不勻,成片分布,抱團生長,來看看你有沒有注意這幾個細節(jié)噢。

    1、如圖所示,HEK 293因消化過度或吹打過猛導(dǎo)致細胞受傷嚴(yán)重,破損的細胞碎片容易粘連抱團;

    2、消化時細胞融合率太高,成片脫落,將不容易被吹散,容易抱團,我們建議細胞融合率達到80%傳代為佳;

    3、吹打力度不足,難以將成片脫落的細胞吹散,容易抱團。



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